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Efeito dos aminoácidos de cadeia ramificada na modulação da resposta inflamatória induzida por LPS em células intestinais CACO-2

Coordenador(es): - Ricardo Ambrósio Fock
Participante(s):

2022 - Atual

Efeito dos aminoácidos de cadeia ramificada na modulação da resposta inflamatória induzida por LPS em células intestinais CACO-2
Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Marcelo Macedo Rogero em 18/04/2023.

Descrição: Introdução: A inflamação é um fator presente na fisiopatologia de doenças agudas e crônicas, e, o intestino, órgão susceptível a disfunções e à disbiose, que está em constante exposição a microrganismos, pode estar associado a este processo. Por outro lado, aminoácidos de cadeia ramificada (ACR) podem apresentar efeitos anti-inflamatórios e antioxidantes em linhagem celular intestinal. Objetivos: Investigar os efeitos in vitro dos ACR na modulação da resposta inflamatória induzida por lipopolissacarídeo (LPS) em modelo de células intestinais Caco-2. Métodos: As células Caco-2 serão cultivadas e armazenadas em garrafas e placas de expressão (n = 6) até atingirem a confluência de 80%. As culturas de células serão distribuídas em seis grupos, sendo: dois grupos controle - controle com meio Dulbecco's Modified Eagle's Medium sem ACR (DMEM-0) e com ACR (DMEM-P) -, grupo leucina (LEU), grupo isoleucina (ISO), grupo valina (VAL) e associação de ACR (LIV). Será adotado um protocolo de pré-tratamento (PT), com os ACR e o LPS. A dosagem de citocinas inflamatórias (IL-1beta, IL-6, IL-8, IL-10 e TNF-alfa) será realizada por meio do método de ELISA. A análise de proteínas (mTOR, AKT, AMPK, NF-5B, TAK-1, IKK-beta, JNK e IkB-alfa) será feita por Western Blotting. Serão avaliados componentes do sistema antioxidante relacionado à glutationa (GSH, GSSH, GPx) por meio de kit comercial. Para as análises estatísticas, será realizada a análise de variância one-way, seguida do teste post hoc de Tukey. Os resultados serão apresentados na forma de média ± desvio padrão e será considerado p < 0,05. Resultados esperados: Espera-se compreender os potenciais mecanismos de ação de ACR - de forma isolada e associados entre si - no que concerne à modulação da resposta inflamatória induzida por LPS. Acredita-se que estes aminoácidos modularão proteínas da via inflamatória por meio de modelo experimental em células Caco-2..
Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa.
Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (2) .
Integrantes: Ricardo Ambrósio Fock - Integrante / Rogero, Marcelo M. - Coordenador / Elizabeth Aparecida Ferraz da Silva Torres - Integrante / Geni Rodrigues Sampaio - Integrante / Bruna Ruschel Ewald Vega Garcia - Integrante.

Palavras-chave: glutamina, macrófago, citocina

Última atualização em 2024-01-15 13:49:00

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